Обследование на сифилис TPHA и расшифровка результатов

Анализ на сифилис TPHA – это трепонемный тест для выявления заболевания, передающегося половым путем, вызванного спирохетами. Основываясь на принципе пассивного слипания эритроцитов, это исследование выявляет антитрепонемные антитела в сыворотке или CSF.

Что представляет собой исследование?

Тест относится к серологическим специфическим исследованиям в диагностике сифилисной инфекции и применяется для первичного скрининга этого венерического заболевания на всех стадиях, кроме ранней.

В результате заражения спирохетой иммунная система вырабатывает специфические антитела или молекулы, которые направлены на борьбу с болезнью. Благодаря этому свойству возможно определить, произошло ли заражение.

В зависимости от продолжительности инфекции кровь пациента содержит:

• антитела IgM – появляются в конце 2 недели после заражения;
• антитела против IgG – появляются через 4 недели после заражения.

Эти антитела обнаруживаются в плазме крови для выявления или исключения инфекции.

Исследование следует проводить как минимум через 3-4 недели после заражения, а для большей уверенности – через 6. Это время, когда бактерии попадают в кровь. Если серологический тест проводится раньше, его результат может быть ложноотрицательным.

Проведение ТРНА анализа требует минимального лабораторного оборудования, результаты могут быть получены через 45-60 минут.

В ходе процедуры испытуемый образец плазмы крови разводят в абсорбирующем растворе для удаления возможных перекрестно реагирующих гетерофильных антител и удаления, блокирования или поглощения потенциально перекрестно реагирующих непатогенных трепонемных антител. Кроме плазмы крови пациента, используются:

• реагенты для обнаружения человеческих сывороточных антител к T. pallidum с помощью метода непрямой гемагглютинации;
• консервированные эритроциты птиц, покрытые антигенными компонентами патогенного T. pallidum (штамм Никола).

При TPHA сыворотку крови пациента добавляют к консервированным эритроцитам птиц, которые экспрессируют антигены T. pallidum. Гемагглютинация (слипание эритроцитов) или скопление антител и клеток крови указывает на инфекцию. Антитела в сыворотке пациента приводят к связыванию клеток крови с более крупными конгломератами.

Любые происходящие неспецифические реакции выявляются с использованием контрольных клеток, которые представляют собой эритроциты птиц, не покрытые антигенами T. Pallidum. Если антител нет, неагглютинированные клетки хорошо оседают на дне пробирки.

Микроскопия в темном поле полезна для подтверждения серологических тестов на сифилис на ранних стадиях заболевания и выполняется с использованием образца ткани, полученного из сифилитического поражения. T. pallidum представляют собой организмы в форме штопора, поэтому их относительно легко идентифицировать с помощью этой техники.

На поздней бессимптомной стадии исследование спинномозговой жидкости является наиболее надежным методом определения возможного поражения центральной нервной системы.

Правила подготовки к сдаче анализа

Анализ крови следует брать натощак. Для получения материала для серологического исследования TPHA берется образец венозной крови из локтевой вены.

Правила подготовки для получения достоверного результата:

1. За 8-12 часов до обследования отказаться от еды.
2. Не следует потреблять тяжелую и жирную пищу и пить алкоголь за день до анализа крови.
3. В день исследования можно выпить небольшое количество воды непосредственно перед сдачей анализа.
4. Время суток может повлиять на достоверность результатов теста. Рекомендуется сдавать кровь утром (7:00 – 10:00). Если кровь собирается в разное время дня, это следует учитывать при интерпретации полученных результатов.
5. Рекомендуется 15-минутный отдых непосредственно перед сбором крови.
6. По возможности тест на сифилис следует проводить до приема лекарств (используемых, например, при хронических заболеваниях).

После забора биоматериала возможно небольшое кровотечение из места, где была взята кровь, образование небольшой гематомы.

Расшифровка результатов

При тесте TPHA расшифровка несет такую информацию:

1. Отрицательный результат. Характерен для здоровых людей, это свидетельствует об отсутствии заболевания, вызванного наличием спирохет.
2. Положительный результат. Может указывать на активную, прошедшую или уже вылеченную инфекцию. Диагноз должен быть поставлен с тщательным анамнезом пациента и физическим осмотром, а также соответствующими лабораторными результатами.
3. Ложноположительный результат. Встречается у пациентов, страдающих проказой, инфекционным мононуклеозом и заболеваниями соединительной ткани. Для подтверждения следует использовать тест FTA-ABS.

При получении сомнительных результатов следует повторно сдать кровь через 1-2 недели или же пройти другие тесты – MHATP и FTA-ABS.

Чтобы расшифровать результаты теста на наличие антител против спирохет в сыворотке крови, в лабораториях не ограничиваются лишь указанием 2 меток «отрицательный» или «положительный». Врачи используют в результатах теста значения титров антител (они помогают оценить стадию болезни и эффективность терапевтического лечения пациента в условиях стационара):

1. Первая стадия болезни характеризуется выявлением значений титров в пределах от 1:80 до 1:300.
2. Переход сифилиса во вторичную стадию выявляется повышением титров до 1:5100 с последующим понижением в латентной фазе до 1:80.
3. После прохождения эффективного лечения значения титров будут существенно снижаться, но могут показывать положительный результат еще долгие годы после излечения пациента.

Исследование обладает более высокой специфичностью, по сравнению с анализами USR и VDRL для скрининга на реагин, а также тестом FTA на спирохеты. Положительный результат реакции наблюдается с 5 недели заражения. TPHA используется для подтверждения положительных результатов проверочных испытаний и в тех случаях, когда исследования VDRL и FTA ABS дают противоречивые результаты.

Заключение

В лабораториях выполняют разные исследования для выявления сифилиса в зависимости от фазы заражения. Реактивные (USR, VDRL, RPR) выполняются в скрининговых тестах. Если их результаты положительные, заболевание должно быть подтверждено спирохет-тестами: FTA-ABS, TPHA, EIA.

Количественные тесты VDRL, RPR и FTA используются для наблюдения за прогрессированием заболевания и контроля после лечения сифилиса. TPHA может показывать положительный результат даже на протяжении всей жизни после излечения заболевания, поэтому его нельзя использовать для контроля лечения.